Question

【題目】（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關(guān)問題：

（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發(fā)酵產(chǎn)物，即將____________氧化成乙醇，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過____________時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過____________。開始時，酵母菌的____________會使發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓，原因是________________________，若這種負(fù)壓情況持續(xù)3天以上，必須加入____________，使發(fā)酵盡快發(fā)生。

（二）某研究小組欲利用抗蟲基因，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育抗蟲玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗蟲基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點和抗生素抗性基因（pstⅠ、Sma Ⅰ、Alu Ⅰ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因）請回答：

（1）為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用_________（填限制酶的種類）分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用 DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經(jīng)過________處理的______________（A.有amp和tet B.有amp，無tet C.無amp，有tet D.無amp和tet）農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細(xì)胞，使目的基因?qū)�入玫瑰�?xì)胞中。

（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在______________上，進行液體懸浮培養(yǎng)獲得胚性細(xì)胞，進而培育成抗蟲玫瑰。

（3）這種借助基因工程方法，將外源基因?qū)�入受體細(xì)胞，再通過這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是______________。

（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，可發(fā)展__________工程，并在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟效益、社會效益和__________。

Answer 1

【答案】 葡萄糖 16% 乙醇 2/3 需氧呼吸（或有氧呼吸） 需氧呼吸消耗O2，產(chǎn)生CO2，但CO2溶解度大于O2，使發(fā)酵瓶內(nèi)氣體量減少形成負(fù)壓 酵母 Sma I和PstI CaCl2 D 搖床 植物細(xì)胞工程技術(shù) 生態(tài)旅游 生態(tài)效益

【解析】本題考查果酒和果醋的制作、基因工程等生物技術(shù)及其應(yīng)用等知識，要求考生掌握果酒和果醋的制作原理和方法，熟練進行發(fā)酵操作；能利用所學(xué)知識解讀圖形，選擇合適的限制酶獲取目的基因并切割質(zhì)粒形成重組DNA分子；掌握基因工程的操作程序及其應(yīng)用，了解植物細(xì)胞工程技術(shù)及生態(tài)工程。

（一）（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發(fā)酵產(chǎn)物，即將葡萄糖氧化成乙醇；當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將乙醇氧化而來的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒時，發(fā)酵瓶裝量不能超過2/3。開始時，酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會使發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓，原因是需氧呼吸消耗O2，產(chǎn)生CO2，但CO2溶解度大于O2，使發(fā)酵瓶內(nèi)氣體量減少形成負(fù)壓；若這種負(fù)壓情況持續(xù)3天以上，必須加入酵母，使發(fā)酵盡快發(fā)生。

（二）（1）分析圖一可知，獲取目的基因可用限制酶SmaI和PstI或只使用PstI，切割質(zhì)粒時必需保證標(biāo)記基因不能全部被破壞，因此為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用Sma I和PstI分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用 DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，此時的重組DNA分子中的標(biāo)記基因為amp；再與經(jīng)過CaCl2處理（使其成為感受態(tài)細(xì)胞）的無amp和tet的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細(xì)胞，使目的基因?qū)�入玫瑰�?xì)胞中。

（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上震蕩，進行液體懸浮培養(yǎng)獲得胚性細(xì)胞，進而培育成抗蟲玫瑰。

（3）這種借助基因工程方法，將外源基因?qū)�入受體細(xì)胞，再通過這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是植物細(xì)胞工程技術(shù)。

（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，可發(fā)展生態(tài)旅游工程，并在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益。