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        1. 35. 回答有關(guān)“基因工程”方面的問題(共10分)

          I.請分析下面一項專利:

          申請專利號

          03109739.1

          專利申請日

          2003.04.14

          名稱

          利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)胰島素的方法

          公開號

          1458161

          公開日

          2003.11.26[

          申請(專利權(quán))

          林忠平

          地址

          北京市北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院

          發(fā)明(設(shè)計)人

          林忠平、倪挻、陳溪、胡雷

          專利摘要

          本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛密碼子的原則來設(shè)計所含的密碼子,通過人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列,避免胰島素在植物細胞中的降解。將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中,在番茄的果實中表達人胰島素。

          (1)此基因工程中,目的基因是               。檢測受體細胞中是否存在目的基因,方法有               。這項專利所依據(jù)的遺傳學(xué)原理主要是                  。

          (2)重組時,在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列的目的是                     

          (3)為了防止目的基因通過花粉轉(zhuǎn)移到其他植物,應(yīng)該把目的基因?qū)胧荏w細胞的

                           中。

          II.下圖描述的是上述利用轉(zhuǎn)基因番茄獲得產(chǎn)品的過程。已知限制酶a的識別序列和切點是—GGATCC— ,限制酶b的識別序列和切點是—GATC—。

           

           

           

                                                

          (1)圖中①的過程是______過程。

          (2)圖中②的過程,在基因工程中的步驟是________________。

          (3)目的基因與農(nóng)桿菌質(zhì)粒重組過程中,對符合設(shè)計要求的質(zhì)粒進行酶切。請畫出農(nóng)桿菌質(zhì)粒被限制酶a切割后所形成的兩個DNA片段末端堿基序列______________。

          (4)目的基因?qū)爰毎笠晒Ρ磉_,需經(jīng)歷______和______兩個過程。

          (1)人胰島素基因;受體細胞中是否具有某些標記基因;堿基互補配對

          (2)使合成的胰島素在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存,以免被降解  (3)葉綠體或線粒體

          (4)逆轉(zhuǎn)錄   (5)將重組DNA分子(重組質(zhì)粒)導(dǎo)入受體細胞

          (6)- G          GATCC -

                |       和       |

              - CCTAC          G -

          (7)轉(zhuǎn)錄;翻譯

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