Question

【題目】下圖為利用人成纖維細(xì)胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細(xì)胞(具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活)進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關(guān)問題。

（1）操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代_______________代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是_________。

（2）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過細(xì)胞膜融合形成____________細(xì)胞，再經(jīng)過一次____________，形成單核細(xì)胞。HAT培養(yǎng)基起____________培養(yǎng)作用，操作中加入烏本苷的目的是____________。

Answer 1

【答案】（1）10 PEG

（2）多核或雙核（2分） 有絲分裂 選擇 選出雜交瘤細(xì)胞（2分）

【解析】（1）成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變的細(xì)胞株，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是PEG（或滅活病毒）．

（2）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過細(xì)胞膜融合形成多核細(xì)胞，經(jīng)過一次有絲分裂，形成單核細(xì)胞．據(jù)題干信息，人成纖維細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用，篩選出人成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞，操作中加人鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，篩選出雜交細(xì)胞。