Question

【題目】為研究雙氫青篙素（DHA）對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的作用，科研人員提出以下實(shí)驗(yàn)思路：

（1）取HCT116細(xì)胞用胰酶消化后，再用含血清的培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，分別接種于4塊培養(yǎng)板（一種多孔的細(xì)胞培養(yǎng)器具）的培養(yǎng)孔內(nèi)，置于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)12h。

（2）取出培養(yǎng)板，吸棄培養(yǎng)孔內(nèi)上清液后向每孔中加入含有不同濃度DHA的培養(yǎng)液（濃度分別為0、125、250、500nmol/L），每個濃度加3個培養(yǎng)孔，置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。其它培養(yǎng)板也做相同處理。

（3）分別于加藥后12、24、48、72 h后，各取一塊培養(yǎng)板，采用MTT檢測法測定各孔內(nèi)培養(yǎng)液的光吸收值（OD值），計算抑制率[抑制率=（1-加藥組OD/對照組OD）×100%]。

（說明：MTT，即四唑氮藍(lán)，它能被活細(xì)胞線粒體中一種與檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶還原成不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶，而死細(xì)胞中此酶無活性，不能產(chǎn)生藍(lán)紫色結(jié)晶。故可經(jīng)相關(guān)處理后測OD值反映細(xì)胞存活率和抑制率。）

請回答：

（1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵?/span>

（2）請設(shè)計一張表格用于記錄實(shí)驗(yàn)時所測得的數(shù)據(jù)，便于抑制率的計算。

（3）實(shí)驗(yàn)中需要控制的無關(guān)變量有 （至少寫出兩個）。每個DHA濃度需加3個培養(yǎng)孔，是為了 。

（4）若最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以坐標(biāo)圖呈現(xiàn)，則縱坐標(biāo)應(yīng)標(biāo)識為 。

Answer 1

【答案】（1）探究DHA濃度及給藥時間對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用（探究DHA濃度及給藥時間對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制效應(yīng)，其他合理答案也可）

（2）

（3）溫度、培養(yǎng)液pH、細(xì)胞數(shù)、孔內(nèi)添加培養(yǎng)液的量等 求平均值，減少實(shí)驗(yàn)誤差

（4）抑制率

【解析】

試題分析：（1）分析給出的實(shí)驗(yàn)思路：該實(shí)驗(yàn)的自變量為不同濃度DHA的培養(yǎng)液和給藥時間，因變量是檢測人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞存活率和抑制率，據(jù)此可知該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵禾骄?/span>DHA濃度及給藥時間對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用。

（2）繪制表格時，第一行和第一列應(yīng)分別為時間和DHA濃度（或者是DHA濃度和時間）；由題意“每個濃度加3個培養(yǎng)孔，分別于加藥后12、24、48、72 h后采用MTT檢測法測定”可知：每個濃度應(yīng)分別在12、24、48、72 h記錄4組OD值數(shù)據(jù)，即孔1、孔2、孔3及其平均值。詳見答案。

（3）實(shí)驗(yàn)中需要控制的無關(guān)變量有溫度、培養(yǎng)液pH、細(xì)胞數(shù)、孔內(nèi)添加培養(yǎng)液的量等。每個DHA濃度需加3個培養(yǎng)孔，是為了求平均值，減少實(shí)驗(yàn)誤差。

（4）由于實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵禾骄?/span>DHA濃度及給藥時間對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用，檢測的OD值能反映細(xì)胞存活率和抑制率，所以若最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以坐標(biāo)圖呈現(xiàn)，則縱坐標(biāo)應(yīng)標(biāo)識為抑制率。