Question

【題目】如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答：

(1)能否利用人的皮膚細(xì)胞來完成①過程？________為什么？__________。

(2)過程②必需的酶是________酶，過程③在體外需要的條件是________，過程④在體外必需的酶是________酶，上圖用________(方法)來獲得目的基因。

(3)在利用A、B獲得C的過程中，必須用________________切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生________________，再加入________，才可形成C。

(4)C的組成除必須含有________、________、復(fù)制原點外，還必須有________和________。

(5)圖中的D是基因工程中的受體細(xì)胞，為了使過程⑧更易進(jìn)行，可________處理D。

Answer 1

【答案】不能由于基因選擇性表達(dá)，人的皮膚細(xì)胞胰島素基因不能表達(dá)得到胰島素逆轉(zhuǎn)錄加熱熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)反轉(zhuǎn)錄法同一種限制酶相同的黏性末端DNA連接酶目的基因標(biāo)記基因啟動子終止子Ca2＋

【解析】

考查利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因及利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)基因產(chǎn)物的的基本操作程序，旨在考查系統(tǒng)掌握基因工程技術(shù)的情況。

(1) 不能從皮膚細(xì)胞中獲得胰島素基因的mRNA,是因為基因選擇性表達(dá)，人的皮膚細(xì)胞胰島素基因不表達(dá)。

(2)過程②是逆轉(zhuǎn)錄，必需的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶。過程③是解旋，在體外需要的條件是加熱。過程④是以DNA一條鏈為模板合成子代DNA，在體外必需的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)酶，上圖用反轉(zhuǎn)錄法來獲得目的基因。

(3) A、B分別是含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒， C是重組質(zhì)粒，此過程中，必須用同種限制酶切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生相同的粘性末端，再加入DNA連接酶，才可形成重組質(zhì)粒。

(4)重組質(zhì)粒必須含有目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點外，還必須有啟動子和終止子。

(5)為了使受體細(xì)胞更容易吸收重組質(zhì)粒，可用處理 Ca2＋處理，使其處于感受態(tài)。