Question

【題目】某轉基因抗病植物的培育過程如圖1所示，圖2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四種限制酶的識別序列及酶切位點。請據圖回答下列問題：

（1）圖中限制酶切割DNA時破壞的是兩個___之間的化學鍵。

（2）在構建圖1中的重組質粒時要保證目的基因被連接在質粒上特定的____和終止子之間才能保證目的基因在受體細胞中被成功_________。

（3）將抗病基因從含抗病基因的DNA中切割下來，使用的限制酶是___，同時也應該用相同的酶對質粒進行切割，這樣處理的原因是_______。請寫出單獨用PstⅠ切割質粒后的片段： ________。

（4）轉基因抗病植物的培育是否發(fā)生了可遺傳變異？________。藥物A會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，根據這一原理可以利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導入重組質粒的受體細胞。由此推斷，重組質粒中應含有________基因作為標記基因。

Answer 1

【答案】脫氧(核糖)核苷酸 啟動子 轉錄（或者填表達） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割質粒才能產生與目的基因相同的末端，便于二者進行拼接 是 抗藥物A

【解析】

分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，其中SmaⅠ酶的切割位點位于抗病基因（目的基因）上；質粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點。所以要獲得重組質粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ對目的基因和質粒進行切割。

（1）限制酶切割的是DNA分子中特定的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）為了保證目的基因在受體細胞中能夠成功表達（或轉錄），在構建圖1中的重組質粒時，目的基因上游和下游必須連接有特定的啟動子和終止子。

（3）根據以上分析已知，切割圖示目的基因和質粒采用的限制酶都是PstⅠ和EcoRⅠ，這樣才能使得質粒和目的基因的兩端具有相同的粘性末端，便于二者進行正確的拼接。根據圖2分析限制酶的識別序列和切割位點可知，單獨用PstⅠ切割質粒后的片段為：。

（4）轉基因技術的原理是基因重組，屬于可遺傳變異；根據題意分析，欲利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因（目的基因或重組質粒）的香蕉細胞，則重組質粒中應含有抗藥物A基因作為標記基因。