Question

【題目】某轉(zhuǎn)基因牛的生產(chǎn)技術(shù)流程如圖。請回答：

（1）利用過程①方法構(gòu)建的基因文庫與基因組文庫相比,最顯著的特征是不含___________。采用PCR技術(shù)大量擴增此目的基因的前提是___________，以便合成引物;擴增過程中溫度呈周期性變化，冷卻后繼續(xù)加熱到70-75℃的目的是______________________。

（2）轉(zhuǎn)入生長激素基因的�？赏ㄟ^乳腺細胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，過程②中，將目的基因與____的啟動子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，通過___________________法導(dǎo)入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________(答出2項)技術(shù)手段獲得轉(zhuǎn)基因牛。

（3）該轉(zhuǎn)基因牛進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)人的生長激素，因而稱作___________反應(yīng)器。若該轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能的原因是______________________。

Answer 1

【答案】內(nèi)含子和啟動子 要有一段巳知目的基因的核苷酸序列使 Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成乳腺蛋白基因顯微注射早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植乳腺生物（乳房生物）目的基因未成功導(dǎo)入（或?qū)�入的目的基因未能準確表達）

【解析】

據(jù)圖分析，圖示為利用基因工程生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因牛的過程，涉及到的技術(shù)有基因工程、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；圖中過程①表示利用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因（生長激素基因）的過程，過程②表示構(gòu)建基因表達載體的過程，是基因工程的核心步驟，基因表達載體的組成成分包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因等。

（1）真核基因的結(jié)構(gòu)包括非編碼區(qū)和編碼區(qū)，編碼區(qū)包括外顯子和內(nèi)含子，非編碼區(qū)的上游含有啟動子、下游含有終止子。利用過程①反轉(zhuǎn)錄法獲得的目的基因只有外顯子對應(yīng)的片段，因此利用該方法獲得的基因文庫與基因組文庫相比，沒有內(nèi)含子和啟動子。采用PCR技術(shù)擴增目的基因的前提條件是要有一段巳知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物；擴增過程中，冷卻后繼續(xù)加熱到70-75℃的目的是使 Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成。

（2）根據(jù)題意分析，轉(zhuǎn)入生長激素基因的�？赏ㄟ^乳腺細胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，所以應(yīng)該將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、終止子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，再通過顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵中，然后利用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)形成早期胚胎，再利用胚胎移植技術(shù)等獲得轉(zhuǎn)基因牛。

（3）由于可以通過轉(zhuǎn)基因牛的乳汁生產(chǎn)人的生長激素，因此轉(zhuǎn)基因�？梢苑Q作為乳腺生物反應(yīng)器；若該轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能是因為目的基因未成功導(dǎo)入，也可能是因為導(dǎo)入的目的基因未能準確表達。