Question

【題目】類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病，致殘性強。研究表明，該病的致病機理與腫瘤壞死因子－α(TNF－α)密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF－α單克隆抗體能有效治療RA。如圖為該單克隆抗體制備過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：

(1)單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的____________、____________技術(shù)。

(2)圖中抗原A是______________，HAT培養(yǎng)基的作用是________________。將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞具有的特點是_______________________________。

(3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學藥物或細胞毒素相結(jié)合制成“______________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細胞并將其殺死。

(4)單克隆抗體的特點是____________________________________。

Answer 1

【答案】動物細胞培養(yǎng) 動物細胞融合 TNF－α 篩選雜交細胞 既可以大量增殖又可以產(chǎn)生抗體 生物導彈 特異性強靈敏度高可大量制備

【解析】

本題考查動物細胞工程，考查對單克隆抗體制備流程、特點及應用的理解。明確圖中B淋巴細胞、骨髓瘤細胞、雜交瘤細胞、單克隆抗體的特點是解答本題的關(guān)鍵。

(1)據(jù)圖可知，制備單克隆抗體時，需要將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，然后對雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)，該過程涉及細胞工程中的動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術(shù)。

(2) 制備人鼠嵌合的抗TNF－α單克隆抗體，首先應向小鼠注射抗原TNF－α，使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生能分泌抗TNF－α抗體的漿細胞，HAT培養(yǎng)基作為選擇培養(yǎng)基，B淋巴細胞、骨髓瘤細胞及二者自身融合的細胞在該培養(yǎng)基上面不能存活，只有雜交瘤細胞可以在上面存活，因此可以篩選雜交瘤細胞。B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞既可以大量增殖又可以產(chǎn)生單一抗體。

(3)借助單克隆抗體可以和抗原特異性結(jié)合的特點，把單克隆抗體與化學藥物或細胞毒素相結(jié)合制成“生物導彈”，可以將藥物帶到病變細胞并將其殺死。

(4)與血清抗體相比，單克隆抗體通過雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)獲得，純度高，因此具備特異性強、靈敏度高、可大量制備的特點。

項目	第一次篩選	第二次篩選
篩選 原因	誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過選擇性培養(yǎng)
篩選 方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群
篩選 目的	得到雜交瘤細胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞