Question

【題目】酸菜是經(jīng)乳酸菌發(fā)酵而成的一種發(fā)酵食品，制作過程中極易積累亞硝酸鹽。一些乳酸菌能合成亞硝酸鹽還原酶，能夠顯著降低亞硝酸鹽含量。請(qǐng)回答相關(guān)問題。

（1）為獲得高產(chǎn)亞硝酸鹽還原酶的乳酸菌，某研究組以東北傳統(tǒng)自然發(fā)酵酸菜為材料進(jìn)行分離。

①在進(jìn)行乳酸菌分離純化時(shí)，科研人員將酸菜發(fā)酵液稀釋后涂布在含溴甲酚綠（遇酸變色）的__________（“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基上，___________（“需氧”或“厭氧”）培養(yǎng)一段時(shí)間后，挑取周圍變色的_________臨時(shí)保存。

②在進(jìn)行高產(chǎn)亞硝酸鹽還原酶菌株篩選時(shí)，將臨時(shí)保存的各菌種分別接種到含______的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間，離心收集上清液，在________酸化條件下，依次加入對(duì)氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽進(jìn)行反應(yīng)，篩選反應(yīng)顯色較_____的菌株。

（2）利用篩選得到的菌種進(jìn)行酸菜腌制，測(cè)定亞硝酸鹽含量（單位：mg/kg），結(jié)果如下表所示：

據(jù)表分析，亞硝酸鹽含量最高時(shí)的腌制條件是________________________。為避免細(xì)菌大量繁殖，產(chǎn)生大量的亞硝酸鹽，除控制好表中涉及的腌制條件外，還需控制好腌制的____________。

Answer 1

【答案】鑒別 厭氧 （單個(gè)）菌落 亞硝酸鹽（或NaNO2） 鹽酸 淺 食鹽用量5%，腌制7天 溫度

【解析】

在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；使用選擇培養(yǎng)基的目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，其用途為：鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物，如伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌。

（1）①由于溴甲酚綠遇酸變色，故培養(yǎng)基中的微生物若能產(chǎn)生酸性物質(zhì)，可出現(xiàn)一定的顏色變化，可據(jù)此判斷培養(yǎng)基中是否含有乳酸菌等能產(chǎn)生酸性物質(zhì)的菌體，故含溴甲酚綠（遇酸變色）的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。由于一個(gè)菌落可由一個(gè)菌體繁殖產(chǎn)生，故厭氧培養(yǎng)一段時(shí)間后，為保證菌體的純度，可挑取周圍變色的（單個(gè)）菌落臨時(shí)保存。
②亞硝酸鹽還原酶可將亞硝酸鹽還原，故能夠高產(chǎn)亞硝酸鹽還原酶的菌株能將培養(yǎng)液中的亞硝酸鹽大量還原，使培養(yǎng)液中亞硝酸鹽含量下降。對(duì)亞硝酸鹽含量測(cè)定的原理是：亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。所以在進(jìn)行高產(chǎn)亞硝酸鹽還原酶菌株篩選時(shí)，將臨時(shí)保存的各菌種分別接種到含亞硝酸鹽（或NaNO2）的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間，離心收集上清液，在鹽酸酸化條件下，依次加入對(duì)氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽進(jìn)行反應(yīng)，篩選反應(yīng)顯色較淺的菌株。
（2）據(jù)表分析，亞硝酸鹽含量最高時(shí)的腌制條件是食鹽用量5%，腌制7天。為避免細(xì)菌大量繁殖，產(chǎn)生大量的亞硝酸鹽，除控制好表中涉及的腌制條件外，還需控制好腌制的溫度。