Question

【題目】Rag2基因（核基因重組激活基因）缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞，從而導(dǎo)致先天性免疫缺陷．科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進行如下圖所示的基因治療．其技術(shù)流程如圖：

（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是 ． 培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便 ， 防止其積累對細(xì)胞造成危害．
（2）進行核移植的供體細(xì)胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞 ．
（3）進行步驟①時，卵母細(xì)胞需發(fā)育到期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到期時，可從其分離出ES細(xì)胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從中分離出ES細(xì)胞．
（4）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細(xì)胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細(xì)胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免 ．

Answer 1

【答案】
（1）維持培養(yǎng)液的pH；去除代謝產(chǎn)物
（2）能保持正常的二倍體核型
（3）MⅡ中；囊胚；內(nèi)細(xì)胞團；原始性腺
（4）免疫排斥反應(yīng)
【解析】解：（1.）動物細(xì)胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止其積累對細(xì)胞造成危害．
（2.）進行核移植的供體細(xì)胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型．
（3.）進行步驟①時，卵母細(xì)胞需發(fā)育到MⅡ中期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細(xì)胞團分離出ES細(xì)胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從原始性腺中分離出ES細(xì)胞．
（4.）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細(xì)胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細(xì)胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免免疫排斥反應(yīng)．
【考點精析】根據(jù)題目的已知條件，利用動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程的相關(guān)知識可以得到問題的答案，需要掌握取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．