Question

18．紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂和CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白．請回答下列有關(guān)問題：
（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液．
①加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固．
②以上所述的過程即是樣品處理，它包括紅細(xì)胞的洗滌、進(jìn)行純度鑒定、分離血紅蛋白溶液．
（3）收集的血紅蛋白溶液要進(jìn)行粗分離，其方法是血紅蛋白的釋放．
（4）然后通過法將樣品純化，樣品純化的目的是透析、凝膠色譜去除大分子雜質(zhì)蛋白．最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．
（5）電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離．

Answer 1

分析 血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定．
樣品處理包括四個(gè)步驟，即紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．
透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以讓小分子可以自由進(jìn)出，而大分子不能通過．
樣品純化的目的是通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)除去．

解答 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）①采取血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固．
②樣品處理又包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步．
（3）①透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白．
②透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（4）樣品的純化是通過膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．
（5）電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離．
故答案為：
（1）樣品處理  純化  純度鑒定
（2）①防止血液凝固
②血紅蛋白的釋放
（3）透析
（4）凝膠色譜去除大分子雜質(zhì)蛋白      SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳
（5）大小

點(diǎn)評 本題難度一般，要求考生能夠識記蛋白質(zhì)的提取和分離的相關(guān)知識，考查學(xué)生對蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)操作步驟的識記和理解．